Основные ссылки
|
МУК 4.1.0.358-96 Фотометрическое измерение концентраций глюкозооксидазы в воздухе рабочей зоны.
Государственная система
санитарно-эпидемиологического нормирования Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Фотометрическое измерение
концентраций глюкозооксидазы в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.0.358-96
Минздрав России
Москва · 1999
1. Методические указания
разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций
вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно
безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и
являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в
воздухе рабочей зоны (выпуск 32) утверждены и. о. Председателя
Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного
санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Включенные в данный выпуск методики контроля разработаны и
подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа
12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические
требования», ГОСТа
12.1.016-79 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения
концентраций вредных веществ», ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3,
ГОСТа 8.101-90 «Государственная система обеспечения единства измерений.
Методики выполнения измерений». Методические указания одобрены комиссией по
государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию
Госкомсанэпиднадзора России и Проблемной комиссией «Научные основы гигиены
труда и профпатологии».
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в
воздухе рабочей зоны (выпуск 32) предназначены для центров Госсанэпиднадзора,
санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за
содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также заинтересованных
министерств и ведомств.
Ответственный исполнитель: Г.А. Дьякова
Исполнители: Г.А. Дьякова, Л.Г. Макеева, Е.М. Малинина, С.М. Попова,
Н.С. Горячев, М.И. Аржанова, Т.В. Рязанцева, Е.Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного
государственного санитарного врача
Российской Федерации
Г.Г.
Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.0.358-96
Дата введения: с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Фотометрическое измерение концентраций
глюкозооксидазы в воздухе рабочей зоны
Ферментный препарат
глюкозооксидазы
(К. Ф.
1.1.3.4. b,
a-глюкоза:
О2-оксидо-редуктаза) М.
м. 154000
Глюкозооксидаза представляет
собой желтый кристаллический порошок. Оптимальные условия проявления
ферментативной активности. Т - 30 - 35 °С; рН - 5,8 - 6,0. Хорошо растворим в
воде.
В воздухе находится в виде
аэрозоля.
Является малоопасным веществом,
обладает умеренным кумулятивным и слабым раздражающим действием.
ПДК в воздухе - 2,0 мг/м3.
Характеристика
метода
Метод основан на реакции взаимодействия
остаточных количеств пероксида водорода (после воздействия фермента на глюкозу)
с молибдатом аммония и последующим фотометрическим измерением окрашенного
продукта реакции при длине волны l = 415 нм. Отбор проб проводят с концентрированием на
фильтр.
Нижний предел измерения в
анализируемом объеме - 0,5 мкг.
Нижний предел измерения в
воздухе - 0,2 мг/м3 (при отборе 2,5 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций
от 0,2 до 20 мг/м3.
Измерению мешают: неорганические
вещества, содержащие фосфор, а также азид, гидроксиламин, цианистый водород.
Суммарная погрешность измерения
не превышает ± 10 %.
Время выполнения измерения,
включая отбор проб - 50 мин.
Приборы,
аппаратура, посуда
Фотоэлектроколориметр
или спектрофотометр
Весы лабораторные
аналитические
Фильтры «синяя
лента»
Фильтродержатели ТУ
95-72-05-77
Аспирационное
устройство
Пробирки,
вместимостью 15 мл, с пришлифованной пробкой ГОСТ
10515-75
Пипетки,
вместимостью 1, 2 и 5 мл ГОСТ
20292-74
Колбы мерные,
вместимостью 50 и 100 мл ГОСТ
1770-74
Цилиндр измерительный,
вместимостью 10 мл ГОСТ
23932-79
Бюксы ГОСТ
7148-70
Секундомер
Реактивы,
растворы, материалы
Стандартный раствор
глюкозооксидазы. 10 мг каждого стандартного образца препарата с различной
активностью растворяют в 100 мл дистиллированной воды. При отсутствии набора
стандартов глюкозооксидазы различной активности стандартные растворы
соответствующей активности готовят из раствора фермента в 1000 единиц
активности, разводя этот раствор в 200; 40; 20; 10; 5; 2,5; 2,0 раза. Для
анализа берут по 0,1 мл каждого раствора, что соответствует 0,5; 2,5; 5,0; 10;
20; 40 и 50 ед. активности.
Натрий-ацетатный буферный
раствор готовят смешиванием 0,5 мл 1 н уксусной кислоты и 9,5 мл ацетата
натрия - 1 г в 100 мл.
Вода
дистиллированная ГОСТ 6709-72
Глюкоза, 33 %-ный
раствор ГОСТ
6038-51
Кислота серная, 10
н раствор ГОСТ 4204-77
Молибдат аммония,
0,02 М раствор ГОСТ 3765-78
Фильтры «синяя
лента» ТУ
6-09-1678-77
Отбор
проб воздуха
Воздух с объемным расходом 1 л/мин
аспирируют через фильтр «синяя лента», закрепленный в фильтродержателе. Для
измерения 1/2 ПДК достаточно отобрать 2,5 л воздуха.
Пробы могут сохраняться в
течение 7 дней в холодильнике.
Подготовка
к измерению
Градуировочные растворы
(устойчивы 2 часа) готовят согласно таблице.
Таблица
Шкала градуировочных растворов
Номер стандарта
|
Стандартный* раствор глюкозооксидазы, мл
|
Ацетатный буферный раствор, мл
|
Раствор глюкозы 33 %-ный, мл
|
Содержание глюкозооксидазы, мкг
|
1
|
0
|
5,0
|
1,0
|
0
|
2
|
0,1 (0,5 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
0,5
|
3
|
0,1 (2,5 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
2,5
|
4
|
0,1 (5,0 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
5,0
|
5
|
0,1 (10 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
10
|
6
|
0,1 (20 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
20
|
7
|
0,1 (40 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
40
|
8
|
0,1 (50 ед.)
|
4,9
|
1,0
|
50
|
* Приготовление стандартных растворов см.
разд. Реактивы, растворы, материалы.
|
Для построения градуировочного
графика исходные растворы смешивают и прогревают 1 мин при 30 °С, затем добавляют
1 мл 33 %-ного раствора глюкозы и инкубируют 3 - 5 мин при 30 °С (рН 5,8).
Реакцию останавливают внесением 1,0 мл 10 н серной кислоты, затем добавляют 1,0
мл 0,02 М раствора молибдата аммония. После каждого добавления растворы
перемешивают. Через 20 мин измеряют оптическую плотность на
фотоэлектроколориметре при длине волны 415 нм. Измерение оптической плотности
растворов проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к
раствору сравнения не содержащего глюкозооксидазу.
Строят градуировочный график: на
ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на
ось абсцисс - соответствующие им концентрации препарата (в мкг) с известной
активностью.
Проверку градуировочного графика
проводят 1 раз в месяц или в случае использования новой партии реактивов.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной пробой
переносят в бюкс, заливают 5 мл дистиллированной воды и оставляют на 10 мин,
периодически перемешивая. Отжимают фильтр стеклянной палочкой, фильтрат
переносят в пробирку, доводят объем до 5 мл.
Полученный раствор прогревают
при 30 °С в течение 1 мин. Затем добавляют 1 мл 33 %-ного раствора глюкозы и
инкубируют 3 - 5 мин при 30 °С (рН 5,8). Останавливают реакцию внесением 1,0 мл
10 н серной кислоты. Затем добавляют 1,0 мл 0,02 М раствора молибдата аммония.
После каждого добавления реактива следует хорошо перемешать смесь. Через 20 мин
измеряют оптическую плотность полученного анализируемого раствора, по сравнению
с контрольным раствором, которым является вытяжка с чистого фильтра,
обработанная одновременно и аналогично пробе.
Количественное определение
концентрации глюкозооксидазы в анализируемой пробе проводят по предварительно
построенному градуировочному графику.
При определении активности глюкозооксидазы
в присутствии каталазы, последнюю инактивируют. Для этого к 4,5 см3
испытуемого комплексного ферментного раствора, содержащего не более 50 ед/см3
каталазы, прибавляют 0,5 см3 1 н раствора муравьиной кислоты (в конечной
концентрации 0,1 н) и определяют активность глюкозооксидазы описанным выше
методом.
Расчет
концентрации
Концентрацию вещества (С)
в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:
а - содержание
глюкозооксидазы в анализируемом объеме пробы, мкг;
V - объем воздуха,
отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение
1).
Методические указания
разработаны Киевским госуниверситетом, Украина.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к
стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по
формуле:
Vt - объем воздуха,
отобранный для анализа, л;
Р - барометрическое
давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t - температура воздуха в месте
отбора пробы, °С.
Для удобства расчета V20 следует
пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным
условиям надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
Приложение 2
Коэффициенты для приведения
объема воздуха к стандартным условиям
°С
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
97,33/730
|
97,86/734
|
98,4/738
|
98,93/742
|
99,46/746
|
100/750
|
100,53/754
|
101,06/758
|
101,33/760
|
101,86/764
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2038
|
1,2122
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1460
|
1,1490
|
1,1551
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9778
|
0,9830
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9555
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9391
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9199
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
Приложение 3
Вещества, определяемые по ранее
утвержденным методическим указаниям по измерению концентраций вредных веществ в
воздухе рабочей зоны
Определяемое вещество
|
Ссылка на источник
|
Аммония полифосфат
|
Методические указания на фотометрическое
определение аммиака в воздухе, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 58
|
Алюминия сульфат
|
Методические указания на
фотометрическое определение алюминия, окиси алюминия и алюмоникелевого
катализатора в воздухе, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 3
|
2,5-бифенилилендиацетат
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах
вентиляционных установок, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 235
|
Виндидат
|
Методические указания по измерению
концентраций сульфата калия, калийной магнезии и хлорида калия в воздухе
рабочей зоны методом пламенной фотометрии, в. 22. - М., 1988. - С. 182
|
Диэтилентриамин
|
Методические указания по
фотометрическому измерению концентраций третичных жирных аминов и
аминоспиртов в воздухе рабочей зоны, в. 19. - М., 1984. - С. 137
|
Дубитель хромовый
|
Методические указания на
фотометрическое определение окиси хрома в воздухе рабочей зоны, в. 14. - М.,
1979. - С. 108
|
Дуниты
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах
вентиляционных установок, в. 1 - 5, - М., 1981, - С. 235
|
Кобазол
|
Методические указания по
фотометрическому определению кобальта, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 14
|
Кремния карбид
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах
вентиляционных установок, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 235
|
Полибутилентерефталат
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах
вентиляционных установок, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 235
|
Полимер кубовых остатков
ректификации стирола (термополимер «КОРС»)
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных
установок, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 235
|
В-фенилэтиламидхлоруксусная кислота (контроль по бензолу)
|
Методические указания по
газохроматографическому измерению ацетона, дихлорметана, дихлорэтана,
трихлорэтилена, бензола в воздухе рабочей зоны, в. 9. - М., 1986. - С. 23
|
Фториды редкоземельных
металлов
|
Методические указания по
ионометрическому измерению концентраций солей фтористоводородной кислоты, в.
21. - М., 1986. - С. 269
|
Хлопковая мука
|
Методические указания по фотометрическому
определению БВК в воздухе рабочей зоны, в. 18. - М., 1983. - С. 139
|
Целлюлоза
микрокристаллическая
|
Методические указания на
гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах
вентиляционных установок, в. 1 - 5. - М., 1981. - С. 235
|
Приложение 4
Рис. 1
Ловушка-концентратор.
Общий вид
Рис. 2
Ловушка-концентратор
Источник информации: https://internet-law.ru/stroyka/text/43367/
На эту страницу сайта можно сделать ссылку:
На правах рекламы:
|